上海遠慕生物科技有限公司

皮質醇ELISA試劑盒常見的定量方法
點擊次數:1443 更新時間:2017-06-05

皮質醇ELISA試劑盒常見的定量方法
測定原理:現在皮質醇ELISA試劑盒除非是測定抗體的以外,一般使用的是雙抗體夾心法,此種方法大多數用的是增強的雙抗體夾心法,即使用生物素-親和素系統,及少數的指標可能使用競爭法,這類方法適用于半抗原的測定。
具有復雜結構的多表位蛋白抗原,其雙抗體夾心法中的一個抗體必須用單抗,否則背景很高。當然如果兩個都是單抗(這兩個單抗針對不同表位),那么測定的線性范圍就較寬,試劑盒性能就較好;一個用單抗,一個用多抗,測定的靈敏度會較高。
某些簡單的化合物用皮質醇ELISA試劑盒測定時,因為沒有兩個或以上的表位,一般只能作為半抗原,只能用競爭法測定。如果你發現有測定簡單化合物(如雌激素、NO、)用雙抗體夾心法作測定原理時,這個試劑盒你就要懷疑了。另外還要說明一步雙抗體夾心法與兩步雙抗體夾心法的區別。
一步雙抗體夾心法的吸光度-劑量曲線呈鐘形,隨著待則標本中抗原濃度的增加而升高至一定程度后,測定吸光度即隨抗原濃度的增加而開始下降直至不顯色,即所謂的“鉤狀效應”(hookeHect),也就是我們在免疫沉淀試驗中所稱的“帶現象”(zonephenomenon)。所以當使用一步雙抗體夾心法時,樣品濃度太高,有時會出現測不出來的現象,此時要作適當的稀釋才能準確測定。
皮質醇ELISA試劑盒的組成:用雙抗體夾心法作為測定的方法時,試劑盒的組成一般包括:已包被單抗的酶標板:一塊,有96孔的,也有48孔的,可拆缷,鋁箔袋密封,打開后有干燥劑,實驗時暫未使用的酶標條要連帶干燥劑密封好,放在4℃冰箱中妥善保存。
皮質醇ELISA試劑盒操作步驟
1、準備:從冰箱取出試劑盒,室溫復溫平衡30分鐘。
2、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。
3、加標準品和待測樣本:取足夠數量的酶標包被板,固定于框架上,分別設置標準品孔、待測樣本孔和空白對照孔,記錄各孔位置,在標準品孔中加入標準品50μL;待測樣本孔中先加入待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL(即樣本稀釋5倍);空白對照孔不加。
4、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。
5、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板4次(也可用洗板機按說明書操作洗板)。
6、加酶標工作液:每孔加入酶標工作液50μL,空白對照孔不加。
7、溫育:重復4的操作。
8、洗板:重復5的操作。
9、顯色:每孔先加入顯色劑A 液50μL,再加入顯色劑B液 50μL,37℃避光顯色15min。
10、終止:取出酶標板,每孔加終止液50μL,終止反應(顏色由藍色立轉黃色)。
11、測定:以空白孔調零,在終止后15分鐘內,用450nm波長測量各孔的吸光值(OD值)。
12、計算:根據標準品的濃度及對應的OD值,計算出標準曲線的直線回歸方程,再根據樣本的OD值,在回歸方程上計算出對應的樣品濃度,也可以使用各種應用軟件來計算。zui終濃度為實際測定濃度乘以稀釋倍數。

 

以上資料由上海遠慕生物科技有限公司提供,本司專業代理銷售抗體,培養基,動物血清,標準品對照品,實驗耗材,化學試試,其他試劑,進口/國產ELISA試劑盒,更多產品請!

上海遠慕生物科技有限公司 版權所有 地址:上海市嘉定區曹安公路5588號 郵編:201202 電話: 管理登陸
傳真:021-58999639 手機:13310162040 聯系人:俞燕熙 郵箱:m13310162040@163.com  GoogleSitemap 網址:m.planetchoco.com ICP備案號:滬ICP備14029423號-1
主營:ELISA試劑盒/染色液/溶液 /動物血清/標準品/化學試劑
點擊這里給我發消息
手機:13310162040
主站蜘蛛池模板: 无码午夜人妻一区二区三区不卡视频 | 国产在线精品无码二区| 国产高清无码二区 | 永久免费无码日韩视频| 国产成人无码综合亚洲日韩| 日韩人妻无码精品一专区| 亚洲av无码专区在线观看亚| HEYZO无码综合国产精品227| 18禁网站免费无遮挡无码中文 | 日韩亚洲AV无码一区二区不卡| 日韩免费无码一区二区视频| 久久久久无码国产精品一区| 国产精品无码MV在线观看| 精品人无码一区二区三区| 国产在线精品无码二区| 不卡无码人妻一区三区音频| 亚洲精品无码久久久久久| 久久亚洲AV成人无码国产| 亚洲精品午夜无码电影网| 亚洲Av无码国产情品久久| 亚洲AV无码AV日韩AV网站| 久久久久无码精品国产不卡| 亚洲一区爱区精品无码| 国产成人A亚洲精V品无码| 手机在线观看?v无码片| 18禁无遮挡无码网站免费| 少妇特殊按摩高潮惨叫无码| 亚洲AV综合色区无码二区爱AV| 亚洲AV无码一区东京热| 国产AV无码专区亚洲AV毛网站| 国产成人无码精品久久久久免费| 国产精品第一区揄拍无码| 无码专区国产精品视频| 精品韩国亚洲av无码不卡区| 亚洲国产精品无码久久98| 无码少妇A片一区二区三区| 久久精品无码中文字幕| 亚洲一区二区三区无码影院| 中文字幕无码毛片免费看| 亚洲中文字幕无码久久2017| 无码国内精品人妻少妇|