上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司

    上海遠(yuǎn)慕技術(shù)詳解：免疫血qin純化抗體操作

    免疫血清（immuneserum）亦稱(chēng)抗血清。含有抗體的血清制劑。種類(lèi)很多，包括抗毒素、抗菌血清、抗病毒血清、抗Rh血清等。關(guān)于免疫血qin純化抗體的詳細(xì)操作步驟我公司專(zhuān)業(yè)技術(shù)提供專(zhuān)業(yè)的技術(shù)指導(dǎo)。如下：

    1．剪取一小條0.45μm的硝酸纖維膜，置于1.5mleppendorf管中，浸沒(méi)于1ml1mg/ml的抗原溶液中，5min。

    2．取出膜，置于濾紙上干燥。

    3．將膜放置于裝有1mlBufferA的eppendorf管，輕輕震蕩混勻30min。

    4．移去BufferA，用新鮮的BufferA洗一次，將膜浸沒(méi)于0.8-1ml相應(yīng)的抗血清中，1-2h,于混勻器上輕輕震蕩混勻。

    5．移去血清，用PBS洗膜，4次，每次5min。

    6．洗脫抗體

    新配置100mM甘氨酸（pH2.5）抗體洗脫液，將膜置于洗液中，手輕搖混勻2min，迅速將洗液轉(zhuǎn)移至裝有100μl1MTris（pH8.0）中和，使抗體復(fù)性。第1次洗脫用400μl抗體洗脫液，第2，3次用200μl。

    7．往洗脫下來(lái)的液體中加入100μlBufferA以穩(wěn)定抗體，并分裝成30μl每管，于-20℃保存。

    注：所有步驟均在室溫完成。