PCR方法操作中的注意事項
點擊次數(shù)：761 更新時間：2020-09-07
聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Polymerase Chain Reaction)，簡稱PCR，是一種分子生物學(xué)技術(shù)，用于放大特定的DNA-片段。可看作生物體外的特殊DNA復(fù)制。
PCR是實驗室常用的實驗方法，那么在PCR方法操作中，需要注意哪些事項呢？今天小編帶您了解一下。
配 膠
1.電子稱的使用，要時刻注意保持電子稱的精確性，保持清潔，根據(jù)不同的濃度的膠稱瓊脂糖。
2.加 TAE（化學(xué)試劑）的量要適當(dāng)，以免配出來的膠太薄導(dǎo)致膠孔太淺或濃度太低。
3.倒膠前膠托一定要洗干凈，并擦干；倒膠時要待膠冷到一定溫度搖勻盡量不要產(chǎn)生氣泡。若膠液的溫度太高要頂在膠托防止膠托變形。
點樣電泳
1.loading要點均勻，控制在 1~2ul的量，并做好對應(yīng)標(biāo)記。
2.加樣時，槍頭要上緊，吸樣均一準(zhǔn)確，排液時吸頭不要有殘留。
3.點樣前-好檢查待用膠是否合格；點樣時要對準(zhǔn)膠孔，盡量點完所有的樣。
4.點完樣勿忘點 marker并擺正膠位，電泳儀正負(fù)極不要插反，電泳槽的蓋子要蓋緊。
染 色
1.碰到 EB（化學(xué)試劑）的手套要及時丟棄。
2.EB液要適時跟換，盤子要清洗。
3.抹布要嚴(yán)格區(qū)分，不可交叉使用
凝膠圖像分析儀的使用
1.使用前要注意清潔，以免影響膠圖的清晰度。
2.照膠時盡量減少開紫外燈的時間。
3.拍照時先關(guān)攝像頭再關(guān)紫外燈，不可顛倒，嚴(yán)格按照照膠的流程進行。
4.照好的膠及時丟棄。
