上海遠慕生物科技有限公司

細胞培養(yǎng)基礎知識-冷凍細胞活化
點擊次數(shù):679 更新時間:2021-04-07

1. 冷凍細胞之活化原則為快速解凍,以避免冰晶重新結晶而對細胞造成傷害,導致細胞之死亡。

2. 細胞活化后,約需數(shù)日,或繼代一至二代,其細胞生長或特性表現(xiàn)才會恢復正常 ( 例如產(chǎn)生單株抗體或是其它蛋白質(zhì) ) 。

3. 材料

3.1 37 oC 恒溫水槽

3.2 新鮮培養(yǎng)基

3.3 無菌吸管 / 離心管 / 培養(yǎng)瓶

3.4 液氮或干冰容器

4. 步驟:

4.1 操作人員應戴防護面罩及手套,防止冷凍管可能爆裂之傷害。

4.2 自液氮或干冰容器中取出冷凍管,檢查蓋子是否旋緊,由于熱脹冷縮過程,此時蓋子易松掉。

4.3 將新鮮培養(yǎng)基置于 37 °C 水槽中回溫,回溫后噴以 70 % 酒精并擦拭之,移入無菌操作臺內(nèi)。

4.4 取出冷凍管,立即放入 37 °C 水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在 1 分鐘內(nèi)全部融化,以 70 % ethanol 擦拭保存管外部,移入無菌操作臺內(nèi)。

4.5 取出 0.9 ml 解凍之細胞懸浮液,緩緩加入有培養(yǎng)基之培養(yǎng)容器內(nèi) ( 稀釋比例為 1:10 ~ 1:15) ,混合均勻,放入 CO2 培養(yǎng)箱培養(yǎng)。另取 0.1 ml 解凍細胞懸浮液作存活測試。

4.6 解凍后是否立即去除冷凍保護劑 ( 例如 DMSO 或 glycerol) ,依細胞種類而異,一般而言,大都不需要立即去除冷凍保護劑。惟若要立即去除,則將解凍之細胞懸浮液加入含有 5-10 ml 培養(yǎng)基之離心管內(nèi),離心 1,000 rpm, 5 分鐘,移去上清液,加入新鮮培養(yǎng)基,混合均勻,放入 CO2 培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

4.7 若不需立即去除冷凍保存劑,則在解凍培養(yǎng)后隔日更換培養(yǎng)基。

上海遠慕生物科技有限公司 版權所有 地址:上海市嘉定區(qū)曹安公路5588號 郵編:201202 電話: 管理登陸
傳真:021-58999639 手機:13310162040 聯(lián)系人:俞燕熙 郵箱:m13310162040@163.com  GoogleSitemap 網(wǎng)址:m.planetchoco.com ICP備案號:滬ICP備14029423號-1
主營:ELISA試劑盒/染色液/溶液 /動物血清/標準品/化學試劑
點擊這里給我發(fā)消息
手機:13310162040
主站蜘蛛池模板: 日韩人妻精品无码一区二区三区| 无码av中文一二三区| 亚洲AV无码乱码在线观看牲色| 亚洲中文字幕无码久久精品1| 性生交片免费无码看人| 亚洲国产成人精品无码区在线网站| 亚洲综合最新无码专区| 人妻中文字幕AV无码专区| 人妻少妇精品无码专区二区| 熟妇人妻中文av无码| 国产99久久九九精品无码| 亚洲AV日韩AV高潮无码专区| 无码中文字幕乱在线观看| 人妻无码aⅴ不卡中文字幕| 亚洲色无码专区一区| 亚洲中文字幕无码久久| 中文无码久久精品| 久久亚洲AV成人出白浆无码国产| 日韩AV无码一区二区三区不卡 | 亚洲AV无码成人精品区天堂| 免费无码黄十八禁网站在线观看| 无码精品尤物一区二区三区| 人妻丰满熟妞av无码区 | 无码国产精成人午夜视频不卡| 中文无码伦av中文字幕| 国产网红主播无码精品| 免费a级毛片无码a∨性按摩| 亚洲无码一区二区三区| 国产成人无码免费看视频软件| 蜜桃AV无码免费看永久| 人妻丰满熟妇岳AV无码区HD| 水蜜桃av无码一区二区| 无码人妻精品一区二区三区99仓本 | 少妇人妻无码精品视频app| 国产激情无码视频在线播放性色| 一本加勒比hezyo无码专区 | 国产AV无码专区亚洲Av| 亚洲熟妇无码八AV在线播放| 红桃AV一区二区三区在线无码AV| 日韩精品无码免费专区午夜| 久久午夜无码鲁丝片午夜精品|