區(qū)別一：定義不同
原代細胞培養(yǎng)：原代培養(yǎng)是指由體內(nèi)取出組織或細胞進行的首/次培養(yǎng)，也叫初代培養(yǎng)。
傳代細胞培養(yǎng)：傳代培養(yǎng)是指需要將培養(yǎng)物分割成小的部分，重新接種到另外的培養(yǎng)器皿（瓶）內(nèi)，再進行培養(yǎng)的過程。對單層培養(yǎng)而言，80%匯合或剛匯合的細胞是較理想的傳代階段。
區(qū)別二：特點不同
原代細胞培養(yǎng)：與體內(nèi)原組織在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動上相似性大。由于培養(yǎng)的細胞剛剛從活體組織分離出來，故更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)。這一方法可為研究生物體細胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段。同時也為以后傳代培養(yǎng)創(chuàng)造條件。
傳代細胞培養(yǎng)：當原代培養(yǎng)成功以后，隨著培養(yǎng)時間的延長和細胞不斷分裂，一則細胞之間相互接觸而發(fā)生接觸性抑制，生長速度減慢甚至停止；另一方面也會因營養(yǎng)物不足和代謝物積累而不利于生長或發(fā)生中毒。
區(qū)別三：生存率不同
原代細胞培養(yǎng)：過程相對復雜，培養(yǎng)條件要求也更高。
傳代細胞培養(yǎng)：一般普通培養(yǎng)條件下都容易生存，傳代細胞容易增殖。
區(qū)別四：原理不同
原代細胞培養(yǎng)：將動物機體的各種組織從機體中取出，經(jīng)各種酶（常用胰蛋/白酶）、螯合劑（常用EDTA）或機械方法處理，分散成單細胞，置合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，使細胞得以生存、生長和繁殖，這一過程稱原代培養(yǎng)。
傳代細胞培養(yǎng)：當細胞在培養(yǎng)瓶中長滿后就需要將其稀釋分種成多瓶，細胞才能繼續(xù)生長。這一過程就叫傳代。傳代培養(yǎng)可獲得大量細胞供實驗所需。傳代要在嚴格的無菌條件下進行，每一步都需要認真仔細的無菌操作。
