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淺談蛋白質提取純化的這幾種方法
點擊次數:507 更新時間:2022-06-14

  蛋白質的分離純化在生物化學研究應用中使用廣泛,要利用不同蛋白間內在的相似性與差異,利用各種蛋白間的相似性來除去非蛋白物質的污染,而利用各蛋白質的差異將目的蛋白從其他蛋白中純化出來。

 

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根據蛋白質溶解度不同,蛋白質的分離純化可分為鹽析法和等電點沉淀法。鹽析一般是指溶液中加入無機鹽類而使溶解的物質析出的過程。如:向某些蛋白質溶液中加入某些無機鹽溶液后,可以降低蛋白質的溶解度,使蛋白質凝聚而從溶液中析出。這是一種物理變化,可復原。

等電點沉淀法是利用蛋白質在等電點時溶解度最/低而各種蛋白質又具有不同等電點的特點進行分離提取的方法。在等電點時,蛋白質分子以兩性離子形式存在,其分子凈電荷為零(即正負電荷相等),此時蛋白質分子顆粒在溶液中因沒有相同電荷的相互排斥,分子相互之間的作用力減弱,其顆粒極易碰撞、凝聚而產生沉淀,所以蛋白質在等電點時,其溶解度最小,最易形成沉淀物。等電點時的許多物理性質如黏度、膨脹性、滲透壓等都變小,從而有利于懸浮液的過濾。

需要注意的是,不同的蛋白質,具有不同的等電點。在生產過程中應根據分離要求,除去目的產物之外的雜蛋白;若目的產物也是蛋白質,且等電點較高時,可先除去低于等電點的雜蛋白。同一種蛋白質在不同條件下,等電點不同。

 

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